Лаборатория клеточно-молекулярной физиологии и патологии

Изучение регуляторных и молекулярно-клеточных механизмов функционирования иммунной системы в норме и при различных иммунопатологических процессах и разработка новых методов диагностики, иммунотерапии и иммунореабилитации. В лаборатории создана база для проведения молекулярно-генетических и клеточных технологий. Разработан комплекс биолюминесцентных методов исследования, которые позволяют оценить активность ферментов, характеризующих различные метаболические процессы в клетках, и внутриклеточной концентрации ряда интермедиатов и коферментов. Модифицированы методы хемилюминесцентного анализа для оценки состояния респираторного взрыва в фагоцитирующих клетках. Широко применяются современные методы определения фенотипа клеток (с оценкой уровней экспрессии активационных и адгезионных антигенов). Используется мультиплексный анализ для оценки вне-и внутриклеточной концентрации цитокинов, ростовых и транскрипционных факторов. Внедрены современные методы генетической диагностики предрасположенности человека к различным заболеваниям.

Основные направления

• Изучение эпидемиологии, особенностей патогенеза и течения наиболее распространенных инфекционных, неинфекционных и мультифакториальных заболеваний взрослого и детского населения Сибири и Севера.
• Изучение регуляторно-метаболических механизмов функционирования клеток иммунной системы при онкологических, аутоиммунных и инфекционно-воспалительных заболеваниях.
• Разработка эффективных методов профилактики, диагностики, лечения и реабилитации наиболее распространенных заболеваний коренного и пришлого населения Сибири и Севера.

Задачи исследований

• Определить регуляторные и метаболические механизмы нарушения функциональной активности клеток иммунной системы при онкологических заболеваниях и на их основе разработать методы молекулярно-клеточной терапии и иммунореабилитации.
• Исследовать метаболические механизмы нарушения функциональной активности клеток иммунной системы при инфекционно-воспалительных, аллергических и аутоиммунных заболеваниях и на их основе разработать новые методы диагностики и прогноза характера течения и исхода заболеваний.
• Изучить регуляторно-метаболические механизмы иммунных и воспалительных процессов в генезе основных неинфекционных заболеваний и разработать новые методы и технологии оптимизации их профилактики, диагностики, лечения и реабилитации.
• Установить особенности иммуногенетических показателей у здорового европеоидного населения Красноярского края и у больных мультифакториальными заболеваниями во взаимосвязи с генотипами полиморфных вариантов генов провоспалительных и противовоспалительных цитокинов.

Основные достижения

На основе данных исследований разработана регуляторно-метаболическая концепция развития иммунопатологических состояний, что послужило базой для создания биохемилюминесцентного комплекса индивидуальных методов диагностики иммунометаболических нарушений и оценки воздействия различных лекарственных препаратов на клетки иммунной системы, а также методов прогноза характера течения и исходов различных заболеваний. Разработана концепция механизмов развития иммунодефицитных состояний при адаптации к климато-географическим условиям Крайнего Севера. Подробно исследован фенотипический состав клеток иммунной системы в крови у больных распространенным гнойным перитонитом, на основании чего зарегистрирован новый метод прогноза исхода данного заболевания. Разработана технология получения метаболически-индуцированной дендритноклеточной вакцины с высоким уровнем антигенпрезентационной активности для лечения и иммунореабилитации онкологических больных. Исследование распределения генотипов генов цитокиновой сети и генов белков противоинфекционной защиты организма у коренных национальностей Таймырского Долгано-Ненецкого района Красноярского края и в популяционной группе европеоидов Красноярского края выявили специфические генетические маркеры, позволяющие прогнозировать развитие и течение заболеваний.

Основные приборы и оборудование

• Автоматический биохемилюминесцентный анализатор БЛМ-3606М
• Проточный цитофлуориметр NaviosTM (Beackman Coulter, USA) (Центр коллективного пользования КНЦ СО РАН)
• Проточный цитофлуориметр CytomicsTM FC-500 (Beackman Coulter, USA)
• Проточный флуоресцентный анализатор Luminex™ 200 (ZeusScientific, USA) (Центр коллективного пользования КНЦ СО РАН)
• Флуоресцентный спектрофотометр Agilent Cary Eclipse (Agilent Technologies, USA

Методы исследований

• Биолюминесцентный метод определения внутриклеточной активности NAD- и NADP-зависимых дегидрогеназ и концентрации основных интермедиатов и коферментов.
• Хемилюминесцентный анализ определения интенсивности и кинетики респираторного взрыва в фагоцитирующих клетках.
• Проточная цитометрия – метод регистрации оптических параметров клеток или частиц по сигналам светорассеивания и флуоресценции. Позволяет исследовать фенотип клеток с оценкой уровней экспрессии активационных и адгезионных рецепторов, а также содержание различных внутриклеточных молекул (внутриклеточные цитокины, транскрипционные факторы, регуляторные белки и т.д.).
• Молекулярно-генетические методы – полимеразная цепная реакция (ПЦР, RT-PCR), рестрикционный анализ фрагментов амплификации, электрофоретическая детекция.
• Мультиплексный анализ метаболитов в жидких средах организма invitro- мультиплексный анализатор белков и нуклеиновых кислот MagPix по технологии xMAP на магнитных микросферах позволяет определять до 50 метаболитов в микроколичествах образца.
• Иммуноферментный метод – определение содержания сывороточных общих и специфических иммуноглобулинов, провоспалительных и противовоспалительных цитокинов.
• Спектрофотометрический – определение показателей липопероксидации и факторов антиоксидантной защиты.

Сотрудники

Заведующий лабораторией Савченко Андрей Анатольевич доктор медицинских наук, профессор      +7 905 9713715 aasavchenko@yandex.ru

Фотогалерея лаборатории